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大肠杆菌表达体系的一步澄清与高效捕获工艺优化

两大应用场景:针对性解决蛋白澄清难题

场景一

场景二

可溶性表达蛋白的裂解液澄清

以包涵体形式表达的蛋白,处理更为特殊。目标蛋白在细胞内形成不溶性聚合体,即便经离心初步分离,还需经变性、复性才能恢复天然结构和活性。

以包涵体形式表达的蛋白,处理更为特殊。目标蛋白在细胞内形成不溶性聚合体,即便经离心初步分离,还需经变性、复性才能恢复天然结构和活性。

可溶性表达蛋白的裂解液澄清。

大肠杆菌表达体系:高效更需精准澄清

大肠杆菌表达体系能成为应用最广泛的蛋白质表达系统,优势十分突出。它生长迅速、培养成本低廉,还能实现高产量表达,更重要的是不含真核细胞特有的蛋白翻译后修饰,是简单重组蛋白生产的“理想平台”。

但高效表达背后,蛋白分离的难题不容忽视,无论是可溶性表达还是包涵体形式表达,都需要精准高效的澄清处理,这正是深层过滤技术的专长。

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碧途试验全解析:

两组试验的实测数据,充分印证了碧途深层过滤技术的可靠性能,两款核心滤器的专属适配优势,更让蛋白澄清效果实现进一步优化,展现出显著的应用价值。

  • 料液:大肠杆菌高压破碎离心后样品

  • 浊度:65NTU

  • 深层滤器选择:CP2035

  • 过滤方式:300LMH恒流过滤,单级

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在大肠杆菌裂解后澄清试验中,料液浊度达65NTU,针对性选用了 碧途CP2035深层滤器,过滤精度在0.8~9μm,专为未离心处理的细胞裂解液初级澄清设计。其采用高性能纤维素与硅藻土复合介质,既保证卓越的污染物截留能力,又具备出色的机械耐久性。

试验采用300LMH 恒流单级过滤:过滤载量高达 544.8 L/m²,且无明显蛋白吸附损失;
过滤终点时压力仍低于2psi,浊度小于3NTU,均维持在较低水平,滤器仍有充足余量。
其梯度孔径设计和吸附机制让过滤稳定性拉满,完美适配大肠杆菌裂解液高粘度、高固含量的复杂工况。

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